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技術(shù)文章

Chroma濾光片篩選具有不同顏色強(qiáng)度的細(xì)菌克隆

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  Chroma提供多種TIRF濾光片,應(yīng)用了激光截止濾光片和帶通濾光片的系列濾光片組,包含額外的長(zhǎng)通濾光片,可以極大地提高截止TIRF激光的能力。所有的濾光片都安裝在濾光片立方內(nèi),具有超高的信噪比。用于TIRF激光無(wú)變形反射的2mm厚度的超平面二向色鏡,具有平整度f(wàn)latness=/>0.5waves/inchP-V,RWD。所有的TIRF鏡片組都安裝在金屬立方內(nèi)。
  
  Chroma濾光片,用于篩選具有不同顏色強(qiáng)度的細(xì)菌克隆??筛鼡Q的濾光片可以持續(xù)使用10次,并改善對(duì)彩色克隆的識(shí)別,以準(zhǔn)確地挑取出所需的克隆。兼容QPix™軟件2.0版本以及更高版本。
  
  濾光片的選型:
  
  如何選擇合適的濾光片是廣大科研人員在項(xiàng)目過(guò)程中需要考慮的問(wèn)題。濾光片選型的一般原則是在成像端盡可能讓熒光/發(fā)射光透過(guò),同時(shí)*阻擋激發(fā)光,獲得高的信噪比。尤其是對(duì)于多光子激發(fā)和全內(nèi)反射顯微鏡的應(yīng)用,微弱的噪聲也會(huì)對(duì)成像效果造成很大的干擾,因此對(duì)信噪比的要求更高。
  
  通常判斷濾光片的參數(shù)一般會(huì)看透射率光譜,但往往熒光相對(duì)于激發(fā)光的強(qiáng)度非常弱,因此選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值,OD值更能直觀地反映濾光片對(duì)光的阻擋特性。
  
  在選擇激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片時(shí),兩者的阻擋深度光譜交點(diǎn)(OD交點(diǎn))是重要的判斷標(biāo)準(zhǔn),一般要求寬場(chǎng)光源激發(fā)時(shí)交點(diǎn)OD值大于5,激光激發(fā)時(shí)大于OD6,以實(shí)現(xiàn)較好的熒光信噪比。有時(shí)激發(fā)和發(fā)射濾光片(EX和EM濾光片)的透射光譜組合看起來(lái)很,但轉(zhuǎn)換成OD值之后卻發(fā)現(xiàn)光譜交點(diǎn)僅為OD1,不符合熒光成像的基本要求。因此,一般會(huì)建議激發(fā)和發(fā)射濾光片的透射光譜有一定的距離,比如10nm。
  
  

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